J Clin Invest：揭示USP9X去泛素化ALDH1A3并维持GCSs的间充质特点

结缔组织母细胞膜瘤（GBM）是最类似于和毁灭特质的感知恶特质，其特征在于广泛的内表型。尽管值得注意在多Mode疗程方面取得了进展，但GBM病人的结果无论如何令人沮丧。GBM占有一个细胞膜亚群，称为GBM小鼠（GSCs），具有自我改版活特质和多向发挥作用创造力以及起始能力。因此，迫切需要探索针对GSC的新疗程方针。并且，醛脱氢酶（ALDH）真核细胞包含19种酶，它们将内源和小分子结构醛代谢成附加的醛。ALDH1A3是主要的ALDH同工酶，策划人体细胞膜的各种生理过程。愈加多的确凿暗示，ALDH1A3在癌症小鼠（CSCs）中都表现出高活特质，并影响这些细胞膜内的各种生物学特征。在GBM中都，已辨认出ALDH1A3作为维持有数充质（MES）GSC的自我改版和致瘤特质的更为重要分子结构。然而，MES GSCs中都ALDH1A3失调的组态无论如何是隐秘的。2019年4月8日，南京医科大学第一第二医院王慧博制作团队等人在The Journal of Clinical Investigation上发表题为“USP9X deubiquitinates ALDH1A3and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells”的评论，辨认出USP9X是一种确实的DUB，可缓冲ALDH1A3多IL-化和稳定化。并且，USP9X是预测ALDH1A3hi MES GSCs氟化物的更为重要分子结构，是MES GSCs自我改版和致瘤特质所必需的。同时还评估了USP9X抑制作用对病人来源的MES GSC人造人Dreamcast数学方法的潜在治果。为了未确定ALDH1A3亚基究竟被IL- - 亚基酶体系统（UPS）翻译后管控，研究工作执法人员首先运用于放线菌酮（CHX）受阻亚基质从头合成并HEK293T细胞膜和平常星形结缔组织细胞膜（NHAs）中都的ALDH1A3亚基质水平。仅仅，ALDH1A3在CHX处理方法的8不间断内随之降解并完全探测不到。此外，用亚基酶体药物MG-132处理方法细胞膜造成ALDH1A3亚基水平夙着减低。这些数据暗示ALDH1A3通过UPS降解。接下来，研究工作执法人员寻求鉴定主要职责ALDH1A3稳定化的潜在DUB，并运用于靶向HEK293T细胞膜中都的98DUB的siGENOMERTF文库进行RNAi抽样。该研究工作初始抽样鉴定了与ALDH1A3表达之外的4个DUB（USP3，USP9X，USP22和OTUD1）。当这些DUB与HEK293细胞膜中都的ALDH1A3共表达时，辨认出只有USP9X并不需要与内源特质ALDH1A3仅仅相互作用，从而暗指USP9X是管控ALDH1A3反应特质的夙着候选物。为了测试这一点，将Flag标有的WT USP9X或羧酸失活的突变C1566A USP9X（在羧酸结构域的一个更为重要半胱氨酸中都携带点突变）转染到HEK293T细胞膜中都。 WT USP9X而非C1566A突变的表达以施打依赖特质方法减低ALDH1A3亚基水平，暗示USP9X以依赖于其DUB活特质的方法缓冲ALDH1A3。结缔组织母细胞膜瘤（GBM）小鼠（GSC）的有数充质（MES）亚型代表癌细胞膜亚群，其因其离地侵袭特质和对常规疗法的抗特质而驰名。值得注意已提出醛脱氢酶1A3（ALDH1A3）作为维持GSC的MES特征的更为重要决定因素。然而，支持异常ALDH1A3表达的组态无论如何引人注意。在该研究工作中都，研究工作执法人员辨认出IL-特异特质亚基酶9X（USP9X）是MES GSC中都ALDH1A3的确实去IL-化酶。 USP9X与ALDH1A3相互作用，裂解并稳定化。此外，研究工作结果夙示FACS分选的USP9Xhi细胞膜氟化物具有高ALDH1A3活特质和有效致瘤能力的MES GSC。USP9X的耗用夙着下调ALDH1A3，造成MES GSC的自我改版和致瘤能力的丧失，这可以通过ALDH1A3的甲状腺表达得到很大总体的挽救。此外，研究工作执法人员还推论USP9X药物WP1130诱导ALDH1A3降解并且在MES GSC衍生的原位人造人Dreamcast数学方法中都夙示出夙着的疗程功效。另外，USP9X与病症人GBM样品中都的ALDH1A3表达排斥之外，并且对于具有MES亚组的病人具有肾功能价值。总的来说，研究工作结果揭示了USP9X作为ALDH1A3亚基稳定化的更为重要去IL-化酶和GSC定向疗程的潜在靶点。重构注解：Zhengxin Chen，et al.USP9X deubiquitinates ALDH1A3 and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells.J Clin Invest.April 8， 2019