Lancet ：AAV、LNP递送单碱基编辑器修复血液遗传病，且不产生脱靶效应

早先，肾病疟疾一直是拖累人类所的难题，无论是贫困当中较为少见的红绿色盲，还是拖累欧洲皇室数个世纪的白血病，这些因遗传缺陷而所致的疟疾不仅对患者的贫困造成影响，还构成威胁着患者的生命安正因如此，更不可忽视的是，人类所已见到数千种肾病疟疾，但对其当中的绝大多数仍束手无策。

值得庆幸的是，线粒体学的涌现使得人类所得以认知淋巴瘤的所谓——源自基因本身的基因型。基于此，如果我们能够对这些基因型的基因亚基进行得心应手的主编，使其拿掉确实的核酸，那就可以彻底彻底治愈这些人类所淋巴瘤。

基于CRISPR系统对的胺基酸GUI就是一项十分有希望的、可用于淋巴瘤外科手术的关键技术。但遗憾的是，一些研究成果表明，胺基酸GUI具有脱靶物理现象，确实就会对正常基因亚基进行非抗病毒感染的主编。如果不能补救这一问题，胺基酸GUI在人类所淋巴瘤外科手术当中的应用将遥遥无期。

2021年1月25日，瑞士苏黎世美国联邦康奈尔大学、苏黎世大学以及巴塞尔大学等组合成的联合团队在 Nature Biomedical Engineering 月刊上发表了题为：In vivo cytidine base editing of hepatocytes without detectable off-target mutations in RNA and DNA 的研究成果论文。

这项研究成果通过粘液相关病毒感染（AAV）和钙固态固体（LNP）两种派送表征，分别向肠道消化系统派送核苷酸胺基酸GUI（CBE），并对其进行正因如此基因隐含组和正因如此线粒体脱靶修饰的无偏倚系统性。

研究成果医护人员见到，通过这两种表征派送的核苷酸胺基酸GUI可以修缮病原基因型，而不就会在肝肝细胞的RNA和DNA当中产生脱靶基因型。这一结果支持了核苷酸胺基酸主编外科手术肾病消化系统疟疾的可行性。

据统计，单胺基酸基因型占正因如此部已见到的人类所遗传疟疾的大将近2/3，同时也是许多生物不可忽视性状变异的遗传系统对化。因此，开发一种得心应手且能够低效实现单胺基酸移除的技术就变得尤为不可忽视，华人科学家刘如谦（Did Liu）领导的研究成果团队开发的胺基酸GUI就是为此而生。

核苷酸胺基酸GUI（CBE）正是刘如谦实验室开发的一种胺基酸GUI，它可以实现C？G核酸至T？A核酸的直接移除。

然而，最近的一些研究成果却表明核苷酸胺基酸GUI（CBE）可以在肝细胞系当中所致非抗病毒感染的正因如此基因隐含组脱靶基因型，并在诱导的多能干肝细胞和两肝细胞期受精当中所致数百个正因如此线粒体脱靶基因型。此外，核苷酸胺基酸GUI（CBE）当中所使用的脱氨酶——rAPOBEC1，其在体内的过隐含将确实所致肠道消化系统肥大和肝肝细胞肿瘤。

由此看来，评估核苷酸胺基酸GUI（CBE）等胺基酸GUI的脱靶物理现象以及其他不好物理现象是十分必要的。

在这项研究成果当中，为了评估核苷酸胺基酸GUI（CBE）在体内是否存在脱靶物理现象，研究成果团队信息化研究成果了Pahenu2尿肠道模型，并将SaKKH-CBE3胺基酸主编系统对通过AVV抑制派送到肠道消化系统当中。紧接着，研究成果团队使用RNA测序（RNA-Seq）对从肠道消化系统当中分离出的RNA进行系统性。

AVV抑制的SaKKH-CBE3系统对的Pahenu2肠道消化系统派送和脱靶物理现象评估系统性

研究成果医护人员观察到23%的核酸主编，但与未处理的非常少相比，基因隐含组范围内的C→U的转变并没减小。更像是的是，当转染低剂量的SaKKH-CBE3 mRNA时，虽然与遗传物质转染相比，核苷酸胺基酸GUI（CBE）隐含减小了18倍，但在保留63%的目标主编的同时，还大大减小了非核酸基因型。

这一得出结论核苷酸胺基酸GUI（CBE）的过隐含确实与低的非核酸主编率密切相关。

CBE的过隐含确实与低的非核酸主编率密切相关

与此同时，研究成果团队还评估了AAV抑制的SaKKH-CBE3系统对在进入Pahenu2肠道最后是否就会所致线粒体DNA的非核酸主编。正因如此线粒体测序（S）系统性表明，SaKKH-CBE3系统对并未在肠道消化系统当中引入明显的DNA脱靶基因型。

SaKKH-CBE3系统对可以实现核酸主编主编，且未造成明显的RNA和DNA非核酸基因型

除此之外，研究成果团队还通过钙固态固体（LNP）派送SaKKH-CBE3 mRNA和相关的sgRNA。他们的研究成果得出结论，在钙固态固体（LNP）派送的瞬时隐含SaKKH-CBE3系统对最后，可所致将近21%的抗病毒感染主编并逆转了Pahenu2肠道的疟疾基因型，同时也没检验到正因如此基因隐含组和正因如此线粒体的脱靶主编。

钙固态固体（LNP）派送的主编成本和安正因如此性结果，不输于粘液相关病毒感染（AAV）表征。

通过钙固态固体(LNP)向肠道消化系统当中派送SaKKH-CBE3系统对

综上所述，SaKKH-CBE3系统对在AAV或LNP抑制的消化系统派送后的隐含不仅能有效移除核酸基因型、逆转Pahenu2肠道的疟疾基因型，还不就会对消化系统肝细胞当中的RNA和DNA造成实质性的非抗病毒感染主编。这一见到支持了核苷酸胺基酸GUI（CBE）在外科手术肾病消化系统疟疾的可行性！

值得注意出处：

Chaolin Huang 1, Lixue Huang 2, Yeming Wang 3,et al.6-month consequences of COVID-19 in patients discharged from hospital: a cohort study.Lancet. 2021 Jan 16;397(10270):220-232. doi: 10.1016/S0140-6736(20)32656-8. Epub 2021 Jan 8.