Nature:复合蛋白释放因子Wapl促进V基因重排的机制

巨噬细胞内内的一些生物学步骤，比如V(D)J苯基，一般来说是由染色体贴图官能团所依赖性，包括染色体区室（compartments）、上同调就其结构设计域（topologically associated domains， 全名TADs）和细胞内一个环（chromatin loop）等。TADs是由细胞内一个环做成（chromatin-loop extrusion）所呈现出的，而这一步骤比如说圆一个环椭圆形的牙龈肽多肽（cohesion complex）。与之相对应的是，牙龈肽特赦突变Wapl可以受限细胞内一个环的延伸（loop extension），从而起到负向依赖性的作用。

一系列突变的转化成，构成了体液免疫抵御外来病原体的主要成分，而突变的多样性，是由V(D)J苯基所做到的，这一步骤，比如说Pax5所抑制的2.8Mb窄免疫球肽重链（immunoglobulin hey chain，全名lgh）底物的挤压。然而在当年体B巨噬细胞（pre-B cells）中所，Pax5是如何依赖性lgh挤压的，仍旧不得而知。

近日，来自罗马尼亚Vienna Biocenter的Meinrad Busslinger研究组在Nature上刊载月出版Wapl repression by Pax5 promotes V gene recombination by Igh loop extrusion的短文，阐明Pax5通过减缓Wapl，从而做到对lgh的依赖性。

因为细胞内一个环做成比如说黏性连肽多肽，所以，所作首先研究在当年体B巨噬细胞中所，牙龈肽多肽各组分的暗示究竟发生变化。所作挖掘出，在RNA高度上，相较于其他大类的免疫巨噬细胞，当年体B巨噬细胞和原B巨噬细胞（pro-B cell）的的Wapl高度持续上升了四倍。肽质高度也有类似的挖掘出。这些结果暗示，黏性连肽特赦突变Wapl的持续上升，很确实增高黏性连肽在细胞内上的存留时间。

有报道宣称，Pax5可以依赖性lgh底物挤压，所作接下来探讨，Pax5究竟可以阻碍Wapl在当年体B巨噬细胞中所的暗示。所作通过Pax5等位基因缺陷激素挖掘出，其会了Pax5的当年体B巨噬细胞，Wapl的mRNA高度增高了4~6倍。另外，当年体B巨噬细胞中所，Wapl上存在2个Pax5联结底物P1和P2，而在未成熟的B巨噬细胞中所，联结底物增高至1个（仅存P2）。这些结果暗示，在当年体B巨噬细胞中所，Pax5可以减缓Wapl高度。

在P1敲除激素中所，甲状腺中所的B巨噬细胞愈合大体停留在当年体B巨噬细胞阶段，这暗示，B巨噬细胞愈合是受Wapl上Pax5联结底物P1所依赖性的。另外，通过VDJ脱氧核糖核酸，所作挖掘出，P1敲除的激素，当年体B巨噬细胞中所VDJH的苯基比重显着增高。而在Pax5敲除激素中所，也同样挖掘出类似的现象，并且，Pax5激素lgh底物无法进行挤压。这些结果暗示，Wapl上的Pax5联结底物P1可以其会lgh细胞内一个环做成。

最终，所作关注Pax5对Wapl的减缓，究竟会阻碍当年体B巨噬细胞整个染色体的结构设计。所作挖掘出，只有在B巨噬细胞愈合的更早阶段，Pax5可以阻碍黏性连肽在细胞内上的驻留时间。并且，与正常的当年体B巨噬细胞相比，Pax5敲除激素的当年体巨噬细胞和P1，P2敲除的当年B巨噬细胞，其TADs中所细胞内一个环的呈现出高度显着增高；与此相对的是，大片段的细胞内挤压，从而呈现出染色体间隔的高度，却大大升高。这些结果暗示，在原B巨噬细胞中所，Pax5的联结底物P1所其会的Wapl高度增高，明显阻碍了整个巨噬细胞的染色体结构设计。

综上所述，所作挖掘出，在当年体B巨噬细胞和原B巨噬细胞中所，Pax5可以减缓黏性连肽特赦突变Wapl的暗示，从而延窄黏性连肽在细胞内上的驻留时间，进而促进细胞内一个环做成高度的升高。这一步骤是通过Wapl上的Pax5联结底物P1做到的。而且，Wapl暗示高度的增高，可以招致染色体结构设计的适度变化，这也是当年体B巨噬细胞中所发生高高度的V等位基因苯基的确实原因之一。

值得一提的是，就在这篇Nature截止后的次日，先于印行bioRxiv上在线发布新闻了来自哈佛Frederich AltLaboratory月出版“Loop Extrusion Mediates Physiological Locus Contraction for V(D)J Recombination”的类似工作，同样归功于Wapl通过阻碍细胞内一个环做成阻碍等位基因苯基的重要作用。

原始出处：

Louisa Hill 1, Anja Ebert 1, Markus Jaritz 1, et al.Wapl repression by Pax5 promotes V gene recombination by Igh loop extrusion.Nature. 2020 Jul 1. doi: 10.1038/s41586-020-2454-y.